【小怪兽被抓住了】山东省脐血库实现极微量微生物快速检测技术的重大进展
“十月怀胎,一朝分娩”,随着婴儿的一声哭响和脐带的离断后,承担着“生命保障”的脐带血被医生收集起来。这份“珍贵的生命资源”就运送到山东省脐血库,在脐血库中会经过一系列的处理和检测,其中一项是涉及到脐带血内是否存在细菌和真菌的检测,如果检测到细菌和真菌则不能应用于临床,脐带血就会被废弃处理。
我们若将整袋脐带血比喻为一潭湖水,游离在脐带血中的细菌或是真菌就像是一个个的“小水怪”。目前想要检测出来这些“小水怪”采用的是传统的血液培养法。该方法是将样本接种于培养瓶样中,置于血培仪中进行培养,样本中如果存在微生物,则会代谢产生二氧化碳,就会被仪器捕捉到,则判定脐带血中有微生物的存在。这是血液微生物检测的金标准,但其检测周期长,一般需要5-7天。那如果我们想要尽快使用脐带血怎么办呢,有没有更快速的方法能达到这个目标呢?
这是一个世界难题,但近日山东省脐血库在实现极微量微生物快速检测技术中有了重大进展,对于未来脐带血等血液制品的快速出库和满足临床最佳治疗时机具有非凡意义。
不断技术创新,响应国家指导原则
一直以来,新鲜血液(等生物)制品进行微生物快速检测和出库服务都是快速临床应用的技术瓶颈。我国《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则(试行)》中提出:应根据新的干细胞基础及实验技术研究成果,针对各自干细胞制剂的特性、特定的临床适应症,研发新的快速检验方法,用于干细胞制备过程各阶段的质量控制和制剂的放行检验。山东省脐血库开发脐带血微生物快速检测技术正是为了响应该指导原则,对今后新鲜的脐带血或其他生物产品的快速使用有重要意义。
数字PCR技术
助力脐带血中微生物的极微量快速检测
日前,山东省脐血库研发的利用数字聚合酶链式反应(Digital Polymerase Chain Reaction,PCR)技术,于6小时左右在分子水平上对新鲜血液制品中微量的细菌和真菌进行快速检测。
在血液这样较为复杂的生物体系中,提取极微量的病原微生物核酸是极为困难的。脐带血样本属于混合样本,有大量人细胞的干扰,再一个是细菌和真菌细胞体外具有坚固的细胞壁(如细菌模式图),微量情况更是难以裂解和提取到充足的基因。
在脐带血样本核酸提取过程中,山东省脐血库研发团队借鉴国外先进的技术路线,优化技术参数,将微生物核酸进行富集提纯。使用灵敏度极高的数字PCR技术将提纯得到的核酸进行微液滴制备和PCR反应,经数字PCR仪检测,可以检测到血液中可能存在的微量微生物,检测下限可达每毫升一个真菌细胞或每毫升10个细菌细胞的极限水平。
可以说,脐带血中微生物快速检测技术路线中主要难题已经得到解决,山东省脐血库将不断完善优化血液制品中微生物的提取和检测,相信在不久的未来,不仅在脐带血中可以实现极微量微生物的快速检测,在其他生物制品中,也可以得到应用,极大满足实际需求!
小怪兽,再也翻不起大浪头来喽!
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